一、產品用途：

真菌毒素三合一免疫層析親和柱可選擇性吸附樣品提取液中的真菌毒素B₁、ZEN、DON，從而對樣品液中的真菌毒素起到非常針對性的純化作用，過柱純化后的樣品液純度被提高，可用于不同分析方法的測定。

二、產品概述：

黃曲霉毒素是一類真菌有毒性的代謝產物，是一種毒性*的物質，具有很強的致癌性。在玉米、花生、小麥、棉花種子和一些干果中常能檢測到黃曲霉毒素B₁。玉米赤霉烯酮是由鐮刀菌屬的禾谷鐮抱、黃色鐮抱、木賊鐮刀菌、谷絲核菌、半裸鐮刀菌和鐮抱菌產生的次級代謝物，主要污染玉米、小麥、大麥、燕麥和小米等。嘔吐毒素主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物。

三、反應原理：

真菌毒素三合一免疫層析親和柱測定的原理是抗原抗體反應。真菌毒素單克隆抗體固定于柱內凝膠上，樣品中的真菌毒素經過提取、過濾、稀釋，然后緩慢通過免疫親和柱，在柱內真菌毒素與抗體特異性結合，之后洗滌免疫親和柱，除去未結合的其他物質。用甲醇洗脫，注入到分析儀器中進行檢測。

四、產品包裝組成：

每盒中包含25支真菌毒素免疫親和柱及1套相應說明書。

五、IAC性能：

1、性能參數

2、交叉反應率

六、注意事項：

1、霉菌毒素對人體有害，應戴手套操作。

2、使用過的玻璃容器及霉菌毒素溶液用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。

3、不要使用過了有效日期的免疫親和柱。

4、免疫親和柱不使用時要2-8℃保存，不可凍存。

5、使用前，免疫親和柱需回至室溫（22-25℃）。

6、取樣量：根據實際情況可以適當增減，但不可太少，同時提取液體積要按比例隨之改變。

7、pH：上柱液pH要在6~8之間，若偏離此范圍需用鹽酸或氫氧化鈉調節pH。

七、需要的材料但盒中不提供：

八、試劑配制：

1、提取液：80%甲醇

移取800mL甲醇，加一級水200mL混合。

2、磷酸鹽緩沖溶液（以下簡稱PBS）：稱取8.00g氯化鈉，1.20g磷酸氫二鈉，0.20g磷酸二氫鉀，0.20gkcl，用900mL蒸餾水溶解，然后用鹽酸調節pH值至7.4，后用蒸餾水稀釋定容至1000mL。

九、樣品處理：真菌毒素分析的大誤差來源是樣品的收集和取樣過程，所以要保證樣品收集和取樣的代表性。

（一）一般固體樣品（稀釋倍數：2倍）

1、稱取5g試樣（精確到0.01g）于50ml離心管中；

2、加20.0mL提取液，渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min（或高速均質3min）；

3、在5000r/min下離心10min（或均質后用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）；

4、取濾液4ml，加入24ml PBS溶液，混勻（如混濁，請用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）

（二）植物油脂（稀釋倍數：2倍）

1、稱取5g試樣（精確到0.01g）于50ml離心管中；

2、加20.0mL提取液，渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min（或高速均質3min）；

3、5000r/min離心10min，取上清液備用；

4、取濾液4ml，加入24ml PBS溶液，混勻，（如混濁，請用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）

（三）醬油、食醋（稀釋倍數：2倍）

1、稱取5g試樣（精確到0.01g）于50ml離心管中；

2、用提取液定容至25ml（精確至0.1mL），渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min（或高速均質3min）

3、在5000r/min下離心10min（或均質后用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）；

4、取濾液4ml，加入，加入24ml PBS溶液，混勻，（如混濁，請用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）

十、操作程序：符合國標GB 5009.22-2016

1、連接:將免疫親和柱后蓋取下，用剪刀剪開，重

新蓋上，連接于泵流操作架的30mL注射器下；

2、上樣:移取上述提取液移至注射器內，打開下端堵頭；

3、富集:將空氣壓力泵與注射器連接，調節壓力使樣品提取液緩慢通過免疫親和柱，建議重力過柱；

4、洗滌:用20mL蒸餾水分兩次加壓清洗，棄去全部流出液，并使2-3mL空氣通過柱體；

5、洗脫:為保證洗脫充分，以2.0mL色譜級甲醇進行洗脫，重力洗脫即可。首先，將免疫親和柱內液體排干，加1.0mL甲醇于柱管內，重力過柱，當溶劑通過柱子后；再加入1.0mL甲醇重復上述洗脫步驟，后輕微加壓排凈洗脫液，合并洗脫液，將洗脫液濃縮吹干，用1mL流動相復溶，渦旋30s溶解殘余物，0.22μm濾膜過濾，待測。

十一、操作流程圖示

產品信息：

產品名稱：真菌毒素三合一免疫親和柱

產品貨號：LD-007

產品描述：AFB₁、ZEN、DON單克隆抗體

包裝單位：25支/盒

儲存條件：2～8℃，切勿冷凍

保質期：  18個月

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